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關于細胞后綴-LUC、-GFP、RFP的名詞解釋
發布時間: 2023-12-21 點擊次數: 1810次LUC(Luciferase):
熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統稱,其中最有代表性的是來自北美螢火蟲(Photinus pyralis)體內的熒光素酶。螢火蟲熒光素酶屬于加氧酶(oxygenase),其發光反應需要O2和Mg2+參與;有輔酶A(CoA)存在時能提高反應效率,增加發光時間。螢火蟲熒光素酶無需翻譯后修飾,即可表現出熒光素酶活性。將螢火蟲熒光素酶的基因插入慢病毒介導的載體中,通過CAG啟動子過表達從而作為報告基因,在細胞中表達。常用于細胞標記后小動物細胞移植活體成像追蹤,從而評估移植后細胞的歸巢以及治療效果等。
GFP(Green Fluorescent Protein):
綠色熒光蛋白1962年在一種學名Aequoreavictoria的水母中發現。其基因所產生的蛋白質,在藍色波長范圍的光線激發下,會發出綠色螢光。這個發光的過程中還需要冷光蛋白質Aequorin的幫助,且這個冷光蛋白質與鈣離子(Ca2+)可產生交互作用。將綠色熒光蛋白的基因插入慢病毒介導的載體中,通過flap-Ub啟動子過表達從而作為報告基因,在細胞中表達。常用于細胞標記后移植追蹤,從而評估移植后細胞的歸巢以及治療效果等。
RFP是(Red Fluorescent Protein):
紅色熒光蛋白,目前使用的是 mCherry一種來自于蘑菇珊瑚(mushroom coral)的紅色熒光蛋白,常有于標記和示蹤某些分子和細胞組分。