人轉移胰腺腺癌細胞吉西他濱耐藥株特性介紹
一個胰腺癌病人的腹水中的細胞移植到裸鼠后建立了這個細胞株。
注：本培養基是不直接添加吉西他濱藥物的。如果客戶需要直接添加的我們可以按照客戶的意愿添加吉西他濱藥物。
細胞特性
1） 來源：ASPC-1耐藥篩選
2） 形態：上皮細胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1×10^6 細胞數
4） 用途：僅供科研使用
人轉移胰腺腺癌細胞吉西他濱耐藥株特性運輸、保存及注意事項
復蘇細胞 | 凍存細胞 | |
包裝 | 充液的T25細胞培養瓶 | 1mL凍存管 |
運輸條件 | 常溫 | 干冰 |
保存方式 | 75%酒精消毒瓶壁，置于37℃恒溫細胞培養箱 | -80℃冰箱中保存過夜后轉入液氮/立即復蘇 |
注意事項 | 1. 收到細胞請先就培養瓶/凍存管的外觀、細胞的狀態，進行拍照并保存，如有問題請及時聯系我們； 2. 收到的復蘇細胞，若有較多細胞飄起，可能由于運輸導致。請先置于37℃細胞培養箱中靜置2~4h，待細胞貼壁后再做處理； 3. 復蘇細胞充液培養基為不含藥物的維持培養基，收到細胞后請及時更換為CM培養基； 4. 建議收到細胞后，首先進行擴增，并凍存部分細胞以備用。 | |
細胞耐藥誘導過程
待細胞生長穩定后，開始倍增藥物誘導劑量，每個劑量保持至細胞可以穩定生長至匯合度達50%以上。遞增藥物濃度依次為：0.03μg/mL、0.3μg/mL、1.5μg/mL、3μg/mL、6μg/mL、12μg/mL、18μg/mL。約10個月后，細胞可在18μg/mL GEM藥物濃度下穩定生長，視為耐藥細胞株構建成功，并命名為ASPC-1/GEM。
細胞培養試劑的配制
1）GEM藥物的配制及保存
建議將GEM藥物配制成18mg/mL的母液：即使用1mL DMSO溶液溶解18mg GEM藥物，使其全部溶解。
注意：可根據用量配置藥物，并將藥物分裝保存，避免反復凍融導致藥物失效。溶解后的GEM，4℃保存1周，-20℃保存1個月，-80℃保存6個月。
2）凍存液的配制
90%優質胎牛血清+10%DMSO，現用現配。
3）CM培養基的配制（推薦使用iCell-h005-001b）
成分 | 體積/濃度 |
優質胎牛血清 | 10% |
雙抗 | 1% |
GlutaMAX-1 | 1% |
GEM | 0~18μg/mL |
DMEM培養基 | 補充至所需體積 |
細胞培養條件
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%；溫度：37℃，培養箱濕度為70%~80%。
