細胞名稱:H1
細胞描述:人胚胎干細胞,曾用名WA01
形 態:球形克隆,貼壁生長
來源性別:男性
組織:內細胞團
凍存日期/代數:詳見 凍存管/培養瓶 標識
建議復蘇培養體系:1 個 T25 培養瓶或6cm培養皿
細胞狀態:良好
支原體檢測結果:陰性
細胞用途:僅供科研使用。
STR鑒定結果:
D5S818 9 11
D13S317 8 11
D7S820 8 12
D16S539 9 13
VWA 15 17
TH01 9.3 13
AMEL X Y
TPOX 8 8
CSF1PO 12 13
2.培養流程
2.1.復蘇
在開始復蘇前,將所有試管、預熱后的培養基和培養皿準備好,已確保盡快完成復蘇過程。
1.將凍存管從液氮中取出,快速在37℃水浴槽中解凍,輕柔持續地搖動凍存管,直到只剩下一個小冷凍團。從水浴槽取出凍存管,70%乙醇擦拭進行消毒。
2.使用移液管將凍存管中含有H9細胞的凍存液輕輕轉移至一個含有5-6mL已經預熱的培養基的15mL離心管中,過程必須輕柔防止吹散細胞團。
3.室溫300g離心5min。
4.吸出培養基,確保細胞團完整。
5.然后緩慢加入1mL培養基,用手指輕彈離心管底部,使細胞團脫離底部并分散。
6.輕輕的將此1mL細胞懸液轉移至已包被的培養皿/板/瓶,根據最終培養細胞的液體體積,加入ROCK inhibitor Y27632,終濃度為10μM。
7.將培養皿/板/瓶置于37℃培養箱中,每天更換培養基(換液不需要再添加Y27632,但培養基需提前預熱)。
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