細胞介紹

的人誘導多能干細胞（iPSC-U1）是由人尿液來源人腎上皮細胞通過非整 合的方法誘導獲得。人 iPSC 在無飼養層、化學成分明確、并且無動物源成分的 人多潛能干 細胞培養體系中培養，適合臨床級的干細胞研究和應用。人 iPSC 在人多潛能干細胞培養 體系中可以長期穩定快速增殖，具有高度近似人 ES 細胞的克隆形態和基因表達， 長期維 持正常核型，并在體內外具有三胚層分化潛能。

一、 鋪板 1. 提前一天在4℃冰箱中解凍干細胞鋪底工作液添加劑。

2. 用預冷的移液管將鋪底工作液添加劑和鋪底工作液基礎液按照 1:9的比例混勻。

3. 將鋪底工作液覆蓋瓶底（6孔板1mL，依次類推），置于37℃培 養箱過夜。

4. 使用前，用PBS洗滌一次。 注意：可根據試劑用量將鋪底工作液添加劑分裝保存-80℃，避 免反復凍融。

二、 細胞復蘇:

1. 首先開啟復蘇添加劑小瓶上的鋁蓋，并用酒精棉擦拭其表面， 使用注射器吸取5mL復蘇基礎培養基加入到瓶中，顛倒混勻。

2. 將復蘇添加劑和復蘇基礎液按照0.5mL：10mL的比例混勻，配 置后的復蘇CM培養基保存4℃（可保存2周，可根據試劑用量將 添加劑分裝保存于-80℃，避免反復凍融）。

3. 37℃水浴中，迅速解凍細胞，用酒精棉擦拭，轉移至無菌操作 臺中。

4. 將細胞懸浮液轉移至含有5mL復蘇CM培養基的15mL離心管中 200g離心5min。

5.棄上清，加入適量復蘇CM培養基，輕柔重懸細胞，接種到包被 好的培養瓶中。

6. 水平十字搖勻，室溫放置15min.顯微鏡下觀察大部分細胞貼壁后 ，放入5%CO 的37℃培養箱中。

7. 培養24h后，棄掉復蘇CM培養基，加入新鮮的干細胞CM培養基