細胞介紹
4T1 是從410.4瘤株中未經誘變篩得的6-Thioguanine抗性細胞株。當注射到BALB/c 小鼠中時,4T1自發產生高轉移腫瘤,可轉移到肺,肝,淋巴結和大腦,同時在注射部位形成始發灶。誘導轉移時不需要摘除始發灶。4T1細胞在BALB/c小鼠中的生長與轉移特性與人體中的乳腺癌十分相近。這種腫瘤是人VI期乳腺癌的動物模型。
4T1-誘導的腫瘤在手術后及未手術情況下轉移的動力學相近,可以用作手術后及未手術模型。 跟其他腫瘤模型相比,由于4T1的抗6-硫鳥嘌噙特性,微小的轉移細胞團(少到僅僅1個)也可以在許多遠端器官中檢測到。
該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。
細胞特性
1)來源:小鼠乳腺癌
2)形態:上皮細胞樣 貼壁生長
3)含量:>1x10^6 細胞數
4)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。
細胞篩選
該細胞為穩定轉染Luc的細胞,隨細胞傳代次數的增加,其Luc熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。
建議收到細胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。
初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的培養基維持培養,若無細胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的培養基繼續篩選,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養基培養,至細胞密度約80%,可繼續加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥培養基正常培養。
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的培養基來培養細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。