小鼠肺癌細胞綠色熒光標記描述
Lewis肺癌是一種從C57BL小鼠的肺中建立的細胞系,該細胞帶有原發性Lewis肺癌的植入所致的腫瘤,被廣泛用作轉移的模型,可用于研究癌癥化學治療劑的機制。
該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶GFP基因。
細胞特性
1) 來源:小鼠肺癌組織
2)形態:半貼壁生長,混合形態,有上皮細胞樣,松散貼壁或懸浮有梭形、圓形等細胞形態 。
3)含量:>1x106 細胞數
4)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。
小鼠肺癌細胞綠色熒光標記篩選
該細胞為已經穩定轉染GFP的細胞,隨細胞傳代次數的增加,其GFP熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。建議收到細胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。
初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的CM培養基維持培養,若無細胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的CM培養基繼續篩選,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養基培養,至細胞密度約80%,可繼續加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥CM培養基正常培養。